文献类型：期刊文章

作　　者：赵学勇[1,2,3] 张岩[2,3,4] 于湄[2,3] 田卫东[2,3,4]

机构地区：[1]四川大学再生医学研究中心,成都610041 [2]四川大学口腔疾病研究国家重点实验室,成都610041 [3]四川大学华西口腔医学院口腔再生医学国家地方联合工程实验室,成都610041 [4]四川大学华西口腔医院创伤与整形外科,成都610041

出　　处：《四川大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金(No.30973348);四川省应用基础计划(No.2012JY0077)资助

年　　份：2015

卷　　号：46

期　　号：5

起止页码：773-776

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD2015_2016、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 优化体外获取脂肪组织浸提液的提取方法,比较不同方法提取浸提液的成脂作用。方法 通过贴壁法和悬浮法培养脂肪组织获得浸提液,过滤、冷冻超离心浓缩浸提液,通过BCA试剂盒检测两种方式得到的浸提液分泌因子（secretory factors from adipose tissue explants,SFAE）蛋白总量及蛋白因子得率。等量蛋白成脂诱导第3代（P3）脂肪干细胞,诱导第7~13d,显微镜下观察及进行油红染色,鉴定成脂情况。结果 贴壁法和悬浮法4次提取浸提液中蛋白含量的差异无统计学意义。但悬浮培养法4次重复实验蛋白因子得率更为稳定,贴壁法每次蛋白因子得率数据相差很大,每克脂肪组织获得分泌蛋白的量最小时为7.3mg,最大可得到12.4mg,而悬浮得到的蛋白因子几乎都趋近于8.7mg。并且贴壁培养法与悬浮培养法相比,获取等量的SFAE需要T75培养瓶更多（10个）,且需手工铺匀,贴壁后才能加入培养基,而悬浮培养法仅需悬浮培养瓶1个,加入脂肪组织后即可进行培养。两种方法得到的浸提液都具有促成脂效果,在等量蛋白诱导下的成脂效果差异无统计学意义。结论悬浮和贴壁培养法得到的浸提液具有相同的促成脂能力,但是悬浮培养获得的浸提液更加省时省力且蛋白因子得率稳定,为后续研究和鉴定在SFAE中准确找到成脂因子奠定基础。

关 键 词：脂肪组织 成脂因子  贴壁培养  悬浮培养  

分 类 号：R329]