文献类型：期刊文章

作　　者：傅琼瑶[1] 陈春羽[1] 邬娇[1] 邬强[1] 覃西[1] 钱士匀[1] 易国辉[2] 夏乾峰[1]

机构地区：[1]海南医学院热带医学与检验医学院,海口571199 [2]海南医学院科学实验中心,海口571199

出　　处：《第三军医大学学报》

基　　金：国家自然科学基金地区基金项目(81360240);海南省社会发展科技专项(SF201415);海南省自然科学基金(813187)~~

年　　份：2015

卷　　号：37

期　　号：17

起止页码：1734-1738

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2015_2016、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的采用实时荧光定量PCR技术,建立并评价一种快速、准确、特异检测类鼻疽伯克霍尔德菌的定量检测方法。方法以类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅲ型分泌系统保守基因序列设计引物和探针,构建重组质粒作为DNA标准品,优化荧光定量PCR体系,同时进行方法学评价,并与以16S rRNA基因为靶序列的荧光定量PCR方法进行对比。结果建立了检测类鼻疽伯克霍尔德菌的荧光定量PCR方法,其线性范围为1×101~1×1010拷贝/μL;其灵敏度为10拷贝/μL;批内变异系数（CV）为1.43%~4.6%;对用24份模拟血液标本和67份稻田土壤标本分别采用本法和对照方法进行检测,本菌配制的模拟标本采用两种方法检测均为阳性,且能准确定量,阳性率为100%,而含有其他常见感染细菌的标本检测结果均为阴性;土壤标本中有12份标本采用本法和与细菌培养法均为阳性,但是对照方法未能检测出其中两份低浓度的土壤标本。结论建立的类鼻疽伯克霍尔德菌定量PCR方法具有快速、准确、灵敏度高等特点,可作为环境中该菌检测和疫区类鼻疽病诊断的有效工具。

关 键 词：类鼻疽伯克霍尔德菌 实时荧光定量PCR 定量  

分 类 号：R372] R378.99[基础医学类]