文献类型：期刊文章

作　　者：王彩霞[1] 冯春燕[1] 王巧黎[2] 袁向芬[1] 邓俊花[1] 吕继洲[1] 吴绍强[1]

机构地区：[1]中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所,北京100029 [2]青岛市中心医疗集团,青岛266005

出　　处：《中国畜牧兽医》

基　　金：国家质检公益项目(201210018);国家科技支撑计划课题(2012BAK11B04)

年　　份：2015

卷　　号：42

期　　号：8

起止页码：1935-1942

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为满足贝类寄生虫快速检测需求,本研究根据GenBank中发布的派琴虫ITS序列和包纳米虫18SrRNA序列的保守区域分别设计LAMP扩增引物,分别建立了两种寄生虫的单重LAMP检测方法,进一步对反应体系进行优化,组装成两种寄生虫的双重LAMP方法,同时还进行了特异性检测和敏感性检测,并通过对扩增产物进行限制性内切酶酶切检验双重LAMP方法的准确性。结果表明本研究建立的贝类寄生虫双重LAMP方法具有较好的特异性,检测派琴虫时的最低检测限为10拷贝/μL质粒DNA,检测包纳米虫时的最低检测限为100拷贝/μL质粒DNA,同时酶切试验也验证了双重LAMP检测结果的准确性。对随机采自东海和黄海的20份菲律宾蛤仔和10份美国进口牡蛎的检测结果显示,该双重LAMP方法在口岸检疫工作中可以作为派琴虫和包纳米虫的快速检测方法。

关 键 词：贝类寄生虫病  环介导等温扩增反应(LAMP)  检测  派琴虫  包纳米虫  

分 类 号：Q78]