文献类型：期刊文章

作　　者：曹利利[1] 姚新华[1] 郭衍冰[1] 王英贺[1,2] 任科研[1,3] 魏峰[2] 苑淑贤[1]

机构地区：[1]吉林省畜牧兽医科学研究院,吉林长春130062 [2]吉林农业大学生命科学学院,吉林长春130118 [3]吉林省畜牧兽医总站,吉林长春130062

出　　处：《动物医学进展》

基　　金：吉林省科技发展计划项目(201205071);吉林省科技攻关计划项目(20150204070NY)

年　　份：2015

卷　　号：36

期　　号：9

起止页码：13-17

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为获得柔嫩艾美耳球虫SAG2的克隆株并在卡介苗中表达该蛋白,根据柔嫩艾美耳球虫SAG2基因序列和表达载体图谱设计特异性引物,引入HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点,RT-PCR扩增SAG2基因,连接到pMD18-T载体。双酶切后,将SAG2基因插入到大肠埃希菌-分支杆菌整合表达载体pMV361中,获得重组质粒pMV361-SAG2,经电穿孔转染到卡介苗中,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析。结果成功构建了重组质粒pMD18-T-SAG2和pMV361-SAG2,SAG2在卡介苗中高效表达,表达产物能够被柔嫩艾美耳球虫阳性血清识别,表明具有良好的免疫原性,为下一步重组卡介苗对鸡球虫病的免疫保护研究奠定了基础。

关 键 词：柔嫩艾美耳球虫 SAG2基因  卡介苗 表达  

分 类 号：S852.723]