文献类型：期刊文章

作　　者：韩辉[1] 毕玉国[2] 祁军[2] 胡群[3] 谭绪良[2] 吴海磊[4] 王静[1] 徐宝梁[1]

机构地区：[1]中国检验检疫科学研究院卫生检疫所,北京100123 [2]天津出入境检验检疫局 [3]宁波大榭出入境检验检疫局 [4]江苏出入境检验检疫局

出　　处：《中国国境卫生检疫杂志》

基　　金：国家质检总局科技计划项目(2014IK040和2009IK215);天津市科技计划项目(08ZCKFSH00200)

年　　份：2015

卷　　号：38

期　　号：3

起止页码：153-156

语　　种：中文

收录情况：CAS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的建立霍乱弧菌和拟态弧菌的实时荧光PCR快速检测方法。方法根据霍乱弧菌外膜蛋白W基因(out membrane protein W,omp W)和拟态弧菌溶血素基因(Vibrio mimicus hemolysin gene,vmh)的保守序列设计引物和Taq Man探针,建立快速检测并区分霍乱弧菌和拟态弧菌的双重荧光PCR方法,并对所建立的方法进行灵敏度和特异度评价。结果建立了霍乱弧菌和拟态弧菌双重荧光PCR快速检测方法。优化的反应体系中,omp W引物和探针的浓度分别为100 nmol/L和200 nmol/L;vmh引物和探针的浓度均为100 nmol/L。对两种质粒模板的检测下限均为1.0×102拷贝/μl,扩增效率分别为100.9%和99.7%。灵敏度和特异度均为100.0%。结论基于Taq Man探针的omp W和vmh双重荧光PCR检测方法,具有好的灵敏度和特异度。并且能够在一个反应体系中同时检测两种毒力基因,为繁琐费时的传统检测方法提供了一种快速可靠的替代选择。

关 键 词：霍乱弧菌 拟态弧菌 聚合酶链反应

分 类 号：R117[公共卫生与预防医学类]