文献类型：期刊文章

作　　者：王麟[1] 齐佳昕[2] 张金波[1] 张艳枝[1] 王鹏[3] 王晓艳[3] 梁松鹤[4] 欧芹[5]

机构地区：[1]哈尔滨医科大学大庆校区病理生理学教研室,大庆163319 [2]哈尔滨医科大学附属第五医院心内科,大庆163319 [3]哈尔滨医科大学大庆校区生理学教研室,大庆163319 [4]哈尔滨医科大学大庆校区临床检验教研室,大庆163319 [5]佳木斯大学生化与分子生物学教研室,佳木斯154007

出　　处：《解剖科学进展》

基　　金：黑龙江省教育厅科学技术研究基金项目(No.12521237)

年　　份：2015

卷　　号：21

期　　号：4

起止页码：375-378

语　　种：中文

收录情况：CAS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的建立针对PELP1基因启动子区CpG岛的甲基化特异性PCR(Methylation specific PCR,MSP)检测方法,分析乳腺癌细胞中PELP1基因表达与启动区CpG岛甲基化的相关性。方法设计针对PELP1基因启动子区的MSP引物组,以甲基化和非甲基化DNA为模板验证MSP引物的特异性,建立针对PELP1基因启动子区的MSP检测方法。以DNA甲基转移酶抑制剂5'-氮杂-脱氧胞苷磷酸(5'-Aza-d C)分别处理MCF-7乳腺癌细胞、MCF-10正常乳腺导管上皮细胞,采用MSP检测PELP1基因启动子区甲基化状态变化,采用Western blot检测蛋白表达。结果针对PELP1基因启动子区设计的MSP引物组特异性良好,甲基化特异性引物仅在甲基化DNA模板获得阳性扩增条带,非甲基化引物仅在非甲基化DNA模板获得阳性条带。MCF-7乳腺癌细胞中PELP1基因启动子区呈非甲基化状态,MCF-10正常乳腺导管上皮细胞中PELP1基因启动子区呈甲基化状态,MCF-10细胞中PELP1蛋白表达水平为MCF-7细胞的1/16(P<0.05)。采用5'-Aza-dC去除MCF-10细胞PELP1基因启动子区甲基化后,PELP1蛋白表达水平上升了9.7倍(P<0.05)。结论所建立的PELP1基因启动子区MSP检测方法特异性良好,去甲基化可能是导致乳腺癌细胞中PELP1基因过表达的重要机制。

关 键 词：乳腺癌 脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1  表观遗传学 甲基化特异性PCR

分 类 号：R739.9]