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三种DNA提取方法对检测草莓镶脉病毒稳定性的研究
Stability Assay of Three DNA Extraction Methods for Detection of Strawberry Vein Banding Virus
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]农业应用新技术北京市重点实验室北京农学院植物科学技术学院,北京102206 [2]北京农学院教务处,北京102206
基 金:北京市教育委员会青年拔尖人才培育计划项目(CIT&TCD201304091)
年 份:2015
卷 号:30
期 号:3
起止页码:200-204
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2014、CAB、CSCD、CSCD2015_2016、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:草莓成熟叶片中含有大量的多糖、蛋白质、多酚和色素等物质,影响高质量DNA的提取和下游PCR反应的进行。为确定适用于PCR技术检测草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)的DNA提取方法,从草莓叶片中提取DNA后,对样品中的SVBV进行特异性的PCR检测,比较确定不同DNA提取方法对PCR检测SVBV稳定性的影响。以感染SVBV的草莓叶片为材料,分别采用CTAB试剂盒法、高盐低pH法、改良SDS法提取草莓叶片的总DNA,将不同方法提取的DNA通过紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法进行测定,对DNA产量和质量进行分析。结果表明,3种方法均能获得较为完整的DNA片段,用CTAB试剂盒提取的DNA质量最高,改良SDS法提取的DNA质量较低。将不同方法提取的DNA经过PCR反应特异性检测SVBV后,将与目的片段大小一致的PCR扩增产物经序列测定及分析,证明与SVBV的序列相吻合,证明了方法的可靠性,其质量能够满足PCR特异性检测需要。
关 键 词:植物DNA提取 CTAB试剂盒 高盐低pH法 SDS法
分 类 号:S432.41]
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