文献类型：期刊文章

作　　者：杨丽斌[1] 斯朗扎西[2] 李元朝[3] 何威[3] 王儒鹏[3] 周春丽[3] 张斌[3]

机构地区：[1]乌鲁木齐市友谊医院内分泌科 [2]中国人民解放军77563部队61分队 [3]中国人民解放军第三军医大学附属新桥医院皮肤风湿免疫科

出　　处：《实用医学杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:31000455)

年　　份：2015

卷　　号：31

期　　号：11

起止页码：1744-1747

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:设计并构建一种"可控"型腺病毒载体,该腺病毒载体在加入诱导剂后能自行消亡,从而解决其激发宿主免疫及产生复制型腺病毒等问题,为临床提供一种更安全的外源基因载体。方法:以传统Ad EasyTM腺病毒载体系统为基础,将Cre-Lox P定点敲除系统的Cre酶基因安置在Tet-On诱导表达系统的下游,而在穿梭质粒右臂基因组上下游分别插入一个Lox P位点,构建成"可控"型腺病毒穿梭质粒,并插入全长人胰岛素基因,感染大鼠骨髓间充质干细胞,观察诱导剂加入前后细胞荧光蛋白表达及人胰岛素分泌情况。结果:成功构建携全长人胰岛素基因的"可控"型重组腺病毒Ad Easy N/INS,转染QBI-293A细胞和大鼠骨髓间充质干细胞后,均可观察到绿色荧光的表达,在加入诱导剂Dox后,荧光细胞数/总细胞数的比值及胰岛素水平均显著降低。结论:成功构建了携带人胰岛素全长基因的新型"可控"型腺病毒载体,该新型重组腺病毒可像传统载体一样感染BMCs,且能加入诱导剂后迅速降解,实现了外源基因载体的可控性。

关 键 词：“可控”型腺病毒载体  人胰岛素 降解

分 类 号：R450]