文献类型：期刊文章

作　　者：马驰[1] 王玉平[1] 谢俊秋[1] 张雪燕[1] 徐攀[1] 杜振亚[1] 倪天治[1] 马如超[1] 韩跃武[1]

机构地区：[1]兰州大学医学院基础医学院生物化学与分子生物学研究所,甘肃兰州730000

出　　处：《兰州大学学报（医学版）》

基　　金：甘肃省卫生行业科研管理项目(GWGL2014)

年　　份：2015

卷　　号：41

期　　号：3

起止页码：19-22

语　　种：中文

收录情况：CAS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的将抗菌肽2IQ3及其突变体基因进行原核表达,经纯化获得目的蛋白。方法根据2IQ3氨基酸序列及大肠杆菌偏爱密码原则设计并合成2IQ3基因编码的核苷酸片段,采用重叠延伸聚合酶链反应法扩增抗菌肽2IQ3及突变体基因,克隆至载体p ET-28a(+)中,构建重组表达质粒,转化至大肠杆菌BL21中,经异丙基硫代半乳糖苷诱导表达,分析重组蛋白的表达形式,纯化重组蛋白。结果构建的抗菌肽2IQ3及其突变体基因所表达的重组蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,有特异性目的条带出现,纯化的重组蛋白纯度达97%左右,浓度为0.502 mg/m L。结论成功构建了抗菌肽2IQ3及其突变体基因的原核表达体系,并在大肠杆菌中进行表达、纯化,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。

关 键 词：抗菌肽 突变体 大肠杆菌 纯化

分 类 号：Q78]