文献类型：期刊文章

作　　者：陈琪[1] 江雪梅[1] 孟祥宇[1] 张正竹[1] 宛晓春[1]

机构地区：[1]安徽农业大学茶与食品科技学院,茶树生物学与资源利用国家重点实验室,合肥230036

出　　处：《广西植物》

基　　金：国家自然科学基金重点项目(31170283);安徽省教育厅自然科学重点项目(KJ2013A112)

年　　份：2015

卷　　号：35

期　　号：3

起止页码：384-392

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2015_2016、IC、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：针对NCBI上已登录的茶氨酸合成酶与谷氨酰胺合成酶基因序列进行克隆、原核表达与酶活性验证,利用多种生物信息学数据库和软件,对Cs TS与Cs GS基因进行结构、性质和功能预测,采用同源建模法对蛋白三维结构进行预测,比较并预测催化作用位点的差异;用系统进化树分析从裸子植物到高等被子植物的谷氨酰胺合成酶基因序列,推测其进化的演变过程;通过对原核表达的基因工程菌提取粗酶液进行酶活性测定。结果表明:尽管茶树TS与GS序列高度同源,但是原核表达后的融合蛋白仍然显示了不同的催化能力,蛋白一、二级结构分析显示Cs TS与Cs GS差异不大,但是通过同源建模形成的蛋白三级结构分析显示,Cs TS与Cs GS存在3个催化位点上的差异,这可能是导致其酶活性差异的关键。系统进化分析结果首次确定茶氨酸合成酶应为谷氨酰胺合成酶基因家族成员,按照其细胞定位预测应为胞质型GS,其亲缘关系与同为双子叶植物的葡萄、陆地棉、巴西橡胶树、拟南芥较接近。

关 键 词：茶氨酸合成酶  谷氨酰胺合成酶 蛋白三维结构  同源性分析

分 类 号：Q949[植物生产类] S571.1]