文献类型：期刊文章

作　　者：吴姿蓉[1,2] 古文雅[1] 麦晶莹[1] 陈晓湘[1] 袁竹青[1] 李美丽[1] 马长玲[1]

机构地区：[1]广州医科大学基础学院病原生物学与免疫学教研室,广东广州510182 [2]襄阳市第一人民医院,湖北襄阳441000

出　　处：《中国病原生物学杂志》

基　　金：广州市属高校科技计划项目(No.08A097;No.10A173);广东省医学科研基金项目(No.B2012165);广州市重点学科建设项目(No.B127007);广东省高等教育教学改革项目(No.GDJG20142273)

年　　份：2015

卷　　号：10

期　　号：4

起止页码：329-334

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CSCD、CSCD_E2015_2016、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的研究伯氏疟原虫CSP基因的N端蛋白与小鼠肝细胞膜HPSGs受体结合后在体外、体内的肝组织靶向性。方法将伯氏疟原虫CSP基因N端片段(PbCSP-N)克隆入原核表达质粒pET-28α,经IPTG诱导表达重组蛋白,经亲和层析纯化后采用Western blot方法鉴定;采用Pull-down方法检测PbCSP-N蛋白与小鼠肝细胞表面受体硫酸乙酰肝素糖蛋白(Heparan sulfate proteoglycan,HSPG)的结合力;应用免疫组化、放射性碘标记示踪方法检测该蛋白在体外、体内特异性靶向小鼠肝组织作用。结果成功构建PbCSP-N原核表达质粒并表达、纯化出PbCSP-N重组蛋白(15ku),Pull-down方法证实该蛋白可与小鼠肝细胞膜HPSGs受体结合,免疫组化试验显示该重组蛋白定位于正常小鼠肝细胞膜,表明该蛋白可特异结合正常小鼠肝细胞膜;放射性碘(125I)标记示踪显示,标记的重组蛋白在注射1、2、4、6、12h后在小鼠肝脏分布较多,表明该重组蛋白可靶向正常小鼠肝组织。结论伯氏疟原虫CSP基因N端蛋白与肝细胞膜HPSGs受体结合后在体内、外靶向肝细胞,可作为肝细胞靶向性药物候选分子。

关 键 词：疟原虫,伯氏  CSP N端蛋白  肝细胞

分 类 号：R373.21]