文献类型：期刊文章

作　　者：韩小东[1] 贾天军[1] 贾晓晖[1] 李婷[1] 赵霞[1]

机构地区：[1]河北北方学院医学检验学院病原生物与免疫学研究所,河北张家口075000

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》

基　　金：河北北方学院校级重大课题(ZD201313)

年　　份：2015

卷　　号：31

期　　号：5

起止页码：689-692

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD2015_2016、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的原核表达甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)的CUB1、CUB2功能区蛋白,制备其功能区蛋白的多克隆抗体并进行鉴定。方法利用带有CUB1、CUB2基因片段的p GEX-6P-2原核载体诱导表达GST-CUB1和GST-CUB2融合蛋白并进行纯化,将纯化后的融合蛋白作为抗原,与Freund佐剂充分混合后免疫5周龄BALB/c雌性小鼠,制备多克隆抗体;应用Western blot法检测多克隆抗体特异性,应用ELISA检测多克隆抗体效价。结果成功表达并纯化GST-CUB1和GST-CUB2蛋白;应用其作为抗原对小鼠进行免疫后,成功制备出与其相应的多克隆抗体,且特异性强,与其他蛋白无交叉反应;间接ELISA测得CUB1抗体效价大于1∶32 000,CUB2抗体效价大于1∶16 000。结论成功制备了特异性强,效价高的GST-CUB1和GST-CUB2蛋白多克隆抗体。

关 键 词：MASP-2  CUB1和CUB2功能区片段  蛋白原核表达  多克隆抗体

分 类 号：R392.11] Q786[基础医学类]