文献类型：期刊文章

作　　者：徐敏[1] 高淼[1] 黄峥兰[1] 陶崑[1] 钟梁[1] 冯文莉[1]

机构地区：[1]重庆医科大学检验医学院临床血液学教研室临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆400016

出　　处：《临床检验杂志》

基　　金：教育部博士点基金资助项目(20125503110005)

年　　份：2015

卷　　号：33

期　　号：4

起止页码：301-305

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSCD、CSCD_E2015_2016、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的构建重组腺病毒Ad-SH2-ODC和Ad-AZ1,检测共表达SH2-ODC和AZ1蛋白对BCR-ABL癌蛋白的降解效应。方法PCR扩增src同源结构域2(src homology 2,SH2)、鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)及抗酶蛋白1(antizyme 1,AZ1)基因,构建携带SH2-ODC(SO)或AZ1基因的p Ad Track-CMV腺病毒穿梭质粒,经双酶切和测序鉴定后与腺病毒骨架质粒p Ad Easy-1同源重组,获得重组腺病毒质粒。后者经PacⅠ酶切鉴定后,在人胚肾细胞系AD293中包装、扩增,获得重组腺病毒;腺病毒Ad-SO和Ad-AZ1共感染人白血病细胞系K562,western blot检测目的蛋白的表达。结果双酶切和测序证实,腺病毒穿梭质粒构建正确;PacⅠ酶切结果显示,重组腺病毒质粒构建成功;western blot证实目的蛋白在K562细胞中表达正确,共表达SO和AZ1可以降低BCR-ABL蛋白水平。结论成功构建了Ad-SO和Ad-AZ1重组腺病毒,共表达SO和AZ1可以降解K562细胞中的BCR-ABL蛋白。

关 键 词：BCR-ABL  抗酶蛋白1  SH2结构域 鸟氨酸脱羧酶

分 类 号：R34[基础医学类]