文献类型：期刊文章

作　　者：胡金莲[1] 郑怡文[1] 谷晓蕾[1] 陆国才[1]

机构地区：[1]第二军医大学热带医学与公共卫生学系卫生毒理学教研室,上海200433

出　　处：《北京医学》

基　　金：国家自然科学基金(81473291;81402651);"重大新药创制"科技重大专项(2014ZX09J14106);上海市公共卫生重点实验室建设计划(12GWZX0501)

年　　份：2015

卷　　号：37

期　　号：5

起止页码：476-479

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的建立新生C57乳鼠心肌细胞和成纤维细胞体外原代培养和共培养体系,探讨不同日龄乳鼠心脏细胞的体外增殖特征。方法分离不同日龄C57新生小鼠的心肌细胞和成纤维细胞,分别进行原代培养和共培养,观察细胞的形态和活力变化,测定Cyclin D1、CDK4、GATA4、Nkx2.5以及FGF1的表达。结果差速贴壁90 min后成纤维细胞先贴壁,培养12 h后心肌细胞几乎全部贴壁;共培养心肌细胞多以细胞团的形式贴壁生长。出生5 d以内的乳鼠心肌细胞数量明显增加,共培养的心肌细胞活力更大、增殖速度快;出生5 d以后乳鼠的心肌细胞数量变化并不明显。出生5 d内乳鼠心肌细胞中Cyclin D1和CDK4的表达量较高,且共培养的心肌细胞表达量要高于单独培养的心肌细胞表达量。GATA4、Nkx2.5和FGF1的表达随日龄增大而增加。结论成功建立了新生小鼠心肌细胞和成纤维细胞的体外共培养体系;出生5 d内的乳鼠心肌细胞体外培养时具有较强的增殖能力,且成纤维细胞能促进心肌细胞的增殖,GATA4、Nkx2.5和FGF1有阻止心肌细胞增殖作用。出生5 d后乳鼠的心肌细胞增殖能力减弱甚至消失。

关 键 词：心肌细胞 成纤维细胞  新生小鼠 体外培养  共培养 细胞增殖  

分 类 号：R329.2]