期刊文章详细信息
一步法CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR诊断方法的建立与初步应用
Development and application of double real-time fluorescent quantitative RT-PCR assay for detection of PRRSV and CSFV
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江杭州310021 [2]海盐县畜牧兽医局,浙江嘉兴314300
基 金:浙江省重大科技专项农业项目(2008C12049);浙江省重点科技创新团队(2012R10027-13)
年 份:2015
卷 号:27
期 号:4
起止页码:537-543
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2014、CAB、CSCD、CSCD2015_2016、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:根据猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,分别设计了1对特异性引物和1条Taq Man探针,建立了一步法检测CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法特异性高,与PCV2,PRV,PPV,PEDV,JEV,BVDV无交叉反应;可以检出20个拷贝数的模板RNA,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)低于4%,方法重复性好。应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对50份疑似病例组织进行检测,结果荧光定量RT-PCR检出30份PRRSV阳性,13份CSFV阳性,均高于常规RT-PCR方法的检出数(24份PRRSV阳性,10份CSFV阳性)。本研究建立的双重实时荧光定量RT-PCR方法具有快速、特异性好、灵敏度高的特点,可用于PRRSV和CSFV的实验室快速诊断和流行病学调查。
关 键 词:猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 双重实时荧光定量RT-PCR
分 类 号:S851.347.1]
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