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期刊文章详细信息

连接酶-ELISA反应检测循环DNA基因突变研究    

Study for gene mutation detection of circulating DNA with ligase-ELISA reaction

  

文献类型:期刊文章

作  者:崔海忠[1] 肖娜[2] 张永平[1] 陈大贵[1] 唐一通[2]

机构地区:[1]湖北文理学院医学院枣阳临床学院,441200 [2]湖北文理学院医学院分子医学重点实验室

出  处:《天津医药》

基  金:湖北省卫生计生科研基金(WJ2015MB266);襄阳市科技局项目(襄科业[2012]43号);湖北省教育厅项目(Q20132604);湖北省教育厅高校青年教师深入企业计划项目(XD2014245)

年  份:2015

卷  号:43

期  号:5

起止页码:533-536

语  种:中文

收录情况:AJ、CAB、CAS、IC、JST、PUBMED、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘  要:目的研究一种简便、灵敏的单核苷酸多态性(SNP)分型方法,使其能够在简单实验条件下进行常规的临床样本检测。方法设计针对突变位点的检测探针,通过检测探针的连接、通用扩增、标记和ELISA反应,根据检测位点对应反应管显色值判定突变位点的基因型。以表皮生长因子受体(EGFR)基因外显子21和18上的3个SNP突变位点L858R、L861Q和G719C为检测对象,对62例肺癌血浆循环DNA样本进行检测,并与直接测序结果进行比较。结果通过对3个突变位点的检测,2种方法均在L858R位点检出杂合子突变。直接测序法仅能够明确检出2例杂合子突变,另外1例样本因在突变位点出现不明显的套峰而无法明确判定突变类型。而新方法能够明确检出6例杂合子突变。结论建立了一种基于连接酶-ELISA的简便、灵敏的SNP突变检测方法,适合于在简单实验条件下对不均一样本进行常规突变检测。

关 键 词:多态性  单核苷酸 突变 基因型  DNA连接酶类  酶联免疫吸附测定

分 类 号:R394-33]

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