文献类型：期刊文章

作　　者：朱涛[1] 朱婉玉[2] 宇学峰[2] 毛慧华[2] 邵忠琦[2]

机构地区：[1]天津科技大学,天津300457 [2]天津康希诺生物技术有限公司天津市呼吸道细菌重组及结合疫苗企业重点实验室,天津300457

出　　处：《中国生物制品学杂志》

基　　金：863计划"基因重配多价轮状病毒等新型疫苗研发技术及产品研发"(2012AA02A401)

年　　份：2015

卷　　号：28

期　　号：4

起止页码：402-405

语　　种：中文

收录情况：AJ、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2015_2016、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的 建立一种脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素（CRM197）结合物中游离多糖含量的检测方法,并进行验证。方法 根据脱氧胆酸钠（sodium deoxycholate,NaDC）在酸性条件下可沉淀蛋白的原理,分别对标准蛋白溶液和CRM197蛋白溶液进行酸沉淀处理,考察其蛋白沉淀效果;向脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素结合物中标加多糖衍生物,计算加标回收率,验证方法的准确性;分别采用NaDC沉淀法处理脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素（A、C、Y、W135群）结合物,检测其游离多糖含量,试验重复6次,验证方法的重复性;向标准蛋白溶液中标加不同浓度的NaDC溶液,验证NaDC对蛋白检测的干扰,考察方法的耐用性。结果 不同浓度的标准蛋白溶液经NaDC沉淀法处理后,蛋白浓度在100-300μg/ml范围内,沉淀中蛋白回收率在90%-110%之间,蛋白浓度大于300μg/ml的样品回收率显著降低;4种脑膜炎球菌多糖-CRM197结合物标加多糖衍生物后,再经NaDC沉淀法处理后的游离多糖含量回收率均在80%-110%之间;4种脑膜炎球菌多糖-CRM197结合物6次检测结果的相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）均〈15%;当溶液中NaDC的浓度不高于2%时,对蛋白检测无干扰。结论NaDC沉淀法准确性、重复性和耐用性良好,可用于脑膜炎球菌多糖-白喉类毒素结合物中游离多糖含量的测定。

关 键 词：脑膜炎球菌多糖  白喉类毒素 结合物 游离多糖  脱氧胆酸钠  

分 类 号：R378.4]