文献类型：期刊文章

作　　者：郑邦晓[1] 余湘萍[1] 叶秀云[1] 林娟[1] 杨捷[1]

机构地区：[1]福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州350116

出　　处：《福州大学学报（自然科学版）》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(41306120);海洋公益性行业科研专项(201305015);污染控制与资源化研究国家重点实验室开放课题资助项目(PCRRF12011);国家大学生创新性实验计划资助项目(201310386003)

年　　份：2015

卷　　号：43

期　　号：2

起止页码：285-292

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、JST、MR、RCCSE、ZGKJHX、ZMATH、核心刊

摘　　要：通过简并PCR、TAIL-PCR、SiteFinding PCR等方法从实验室前期筛选得到的一株齿毛菌中获得漆酶Lac基因（包括启动子）序列,将其cDNA转入Pichia pastoris X33中表达,以ABTS（2,2-azinobis-（3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid））为底物测定温度和pH对酶活及其稳定性的影响,并探究重组漆酶的脱色效果.结果表明,Lac DNA长3 129 bp,含有10个内含子,编码的Lac蛋白共有542个氨基酸,与已知漆酶氨基酸序列的相似性最高为60％,在5’端950 bp序列内发现多个可能的启动子元件;成功分泌表达重组漆酶rLac,在含1 mmol·L-1铜离子的YP培养基中28℃发酵15 d达到酶活最高峰2.89 U·mL-1;酶学性质研究发现,rLac的最适作用温度和pH值分别为55℃和3.0,且在pH 4～10及20 ～ 40℃有较好的稳定性;rLac对靛类、偶氮类、三苯甲烷类等多种染料都有脱色效果.

关 键 词：齿毛菌  漆酶 克隆 异源表达 酶学性质 脱色

分 类 号：Q814.9[生物工程类]