文献类型：期刊文章

作　　者：张俭丽[1] 郑旭[2] 王杰[3]

机构地区：[1]沈阳医学院附属卫生学校基础护理教研室,辽宁沈阳110034 [2]沈阳市和平区疾病预防控制中心 [3]沈阳医学院继续教育学院

出　　处：《中国公共卫生》

基　　金：辽宁省自然科学基金(201102214);沈阳市科技局科技计划项目(F11-264-1-29)

年　　份：2015

卷　　号：31

期　　号：5

起止页码：594-597

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD_E2015_2016、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)介导的穿膜肽(TAT)-血管内皮细胞生长因子受体(KDR)siRNA融合基因慢病毒载体,探讨其对人肺癌A549细胞的抑制效果。方法设计合成编码RGD的2条寡核苷酸链,克隆到p GC/TAT-KDR siRNA载体的TAT下游,构建TAT-RGD-KDR siRNA融合基因载体;慢病毒包装并感染A549细胞;通过Western blot和real-time PCR检测A549细胞KDR基因表达水平;通过噻唑蓝法、双色法流式细胞仪和Transwell侵袭实验检测KDR基因沉默对A549细胞凋亡和侵袭力的影响。结果测序和Blast比对证实重组载体中的RGD序列与设计一致;TAT-RGD-KDR siRNA融合基因慢病毒载体转染A540细胞KDR mRNA和蛋白表达水平分别为(22.7±3.9)%和(19.3±2.7)%,明显低于TAT-KDR siRNA融合基因慢病毒载体转染组,差异有统计学意义(P<0.01);该载体具有较强的抑制A549细胞增殖、促进细胞凋亡和抑制细胞体外侵袭力的作用。结论 TAT-RGD-KDR siRNA融合基因慢病毒载体通过抑制细胞KDR mRNA和蛋白表达,抑制A549细胞增殖和侵袭、促进细胞凋亡。

关 键 词：精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸(RGD)  穿膜肽(TAT)  血管内皮细胞生长因子受体(KDR)  TAT-RGD-KDR  siRNA融合基因  慢病毒载体

分 类 号：R373.9]