文献类型：期刊文章

作　　者：张庆[1] 杨慧[2] 李佳[1,2] 谢欣[2] 李静[2]

机构地区：[1]华东师范大学科学与技术跨学科高等研究院,上海200062 [2]中国科学院上海药物研究所国家新药筛选中心,上海201203

出　　处：《生物化学与生物物理进展》

基　　金：国家科技重大专项(2012ZX09301001-005;2013ZX09507001);国家重点基础研究发展计划(973)(2014CB541900);国家自然科学青年科学基金(81202341)资助项目~~

年　　份：2015

卷　　号：42

期　　号：4

起止页码：337-347

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2015_2016、IC、JST、RCCSE、SCI(收录号：WOS:000353528300005)、SCI-EXPANDED(收录号：WOS:000353528300005)、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：G蛋白偶联受体84(GPR84)是C9-C14的中链脂肪酸受体,不仅在脂肪酸代谢和机体免疫反应中发挥着重要作用,而且与多发性硬化症、内毒素血症等炎症性免疫疾病有着密切联系.因此,找到以GPR84为靶点的配体,可能为治疗这些疾病提供一种有效的方法.构建稳定过表达GPR84受体蛋白的细胞系,为筛选GPR84为靶点的配体和研究这些免疫疾病提供了重要途径.本文将含GPR84和Gα16基因质粒共转染到HEK293细胞中,经过抗生素抗性筛选,挑取稳定表达GPR84蛋白的HEK293细胞系.用RT-PCR、免疫荧光染色等实验方法检测了GPR84基因和其编码受体蛋白的表达;用钙流实验、环腺苷酸实验、蛋白质印迹分析、流式细胞分析证实了表达的GPR84具有完整的生物学活性,并利用该细胞系进行了药物高通量筛选,得到了新的GPR84拮抗剂,为进一步阐明GPR84的生物学功能,研究并治疗与其相关免疫疾病奠定了基础.

关 键 词：GPR84  稳定表达  钙流实验  高通量筛选

分 类 号：R965.1] Q257[药学类]