文献类型：期刊文章

作　　者：李文鹏[1] 罗维远[1] 徐毅[2] 丁伟基[2] 陈跃达[2] 张传凯[1] 罗琪[1] 黄正接[1]

机构地区：[1]厦门大学附属第一医院厦门市肿瘤中心肿瘤外科,361003 [2]福建医科大学第一临床医学院

出　　处：《中华肿瘤杂志》

基　　金：福建省医学创新课题（2012-CXB-29）;厦门市科技计划项目（3502220134011、3502220124018）

年　　份：2015

卷　　号：37

期　　号：4

起止页码：251-257

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2015_2016、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨下调转录因子Oct4表达水平对MDA-MB-231乳腺癌干细胞生物学特性的影响及其意义。方法应用无血清悬浮培养法从乳腺癌MDA-MB-231细胞中分离富集乳腺癌干细胞，流式细胞术检测CD44^＋／CD24^-1/low细胞亚群的比例，小鼠皮下成瘤实验和紫杉醇抑制实验鉴定无血清悬浮培养法获得的MDA—MB-231乳腺癌干细胞，逆转录聚合酶链反应和Western blot法检测MDA—MB-231乳腺癌干细胞中Oct4的表达情况，并利用小分子RNA干扰片段干扰Oct4的表达，干扰实验设空白对照组（不转染任何siRNA）、阴性对照组（转染对细胞无任何干扰作用的siRNA序列）和Oct4siRNA组（转染对Oct4基因有干扰作用的siRNA序列）。分别利用四甲基偶氮唑蓝法、Transwell小室法和紫杉醇抑制实验，检测干扰Oct4表达后MDA—MB-231乳腺癌干细胞的增殖能力、侵袭能力和对化疗药物的耐药性。结果MDA—MB-231乳腺癌于细胞以悬浮球的形式生长扩增，MDA—MB-231乳腺癌干细胞CD44^＋／CD24^-/low细胞亚群的比例（92．7％）高于MDA—MB-231乳腺癌细胞（76．6％，P〈0．05）。接种0．2×10^7个／ml细胞数，MDA—MB-231乳腺癌干细胞肿瘤体积为（124．60±13．65）mm^3，大于MDA-MB-231乳腺癌细胞形成的肿瘤体积[（68．20±9．99）mm^3，P〈0．01）]。紫杉醇对MDA-MB-231乳腺癌干细胞的半数抑制浓度（IC50）为（8．20±0．34）μg／ml，高于MDA—MB-231乳腺癌细胞[（4．40±0．48）μg／ml，P〈0．01）]。MDA-MB-231乳腺癌干细胞Oct4的表达水平高于乳腺癌细胞（P〈0．05）。下调Oct4蛋白的表达后，Oct4siRNA组MDA—MB-231乳腺癌干细胞从第3天开始其增殖能力低于空白对照组和阴性对照组（均P〈0．05）。侵袭性实验结果显示，转染72h后，与空白对照组和阴性对照组比较，Oct4siRNA组MDA—MB-231乳腺癌于细胞穿膜数量为（46．52±2．58）个，少于空白对照组[（77．29±

关 键 词：乳腺肿瘤  转录因子  肿瘤干细胞 悬浮培养  RNA干扰 小鼠  

分 类 号：R737.9]