文献类型：期刊文章

作　　者：兰金苹[1] 武鹏程[2] 郭美岑[1] 史佳楠[1] 韦汉福[2] 荣瑞娟[1] 郝育杰[2] 杨烁[1] 白影影[1] 李莉云[1] 吴琳[3] 刘斯奇[3] 尹长城[2] 刘国振[1]

机构地区：[1]河北农业大学生命科学学院,保定071001 [2]北京华大蛋白质研发中心有限公司,北京101318 [3]中国科学院北京基因组研究所,北京100101

出　　处：《生物化学与生物物理进展》

基　　金：国家科技部转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08012-006B);北京市自然科学基金重点项目(5121001)资助~~

年　　份：2015

卷　　号：42

期　　号：3

起止页码：268-276

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2015_2016、IC、JST、RCCSE、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：nptⅡ编码新霉素磷酸转移酶,是转基因实验中最常用的筛选标记基因之一.本研究中,表达了重组新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)蛋白质,制备了单克隆抗体,建立了用免疫印迹检测转基因水稻中NPTⅡ蛋白质的方法,调查了NPTⅡ蛋白质的表达特征,包括遗传特征、表达时空特征、表达丰度和亚细胞定位等.结果表明,该方法可检测到单粒稻米的0.25%(约0.025 mg)样品中的NPTⅡ蛋白质,NPTⅡ的表达符合显性遗传规律,根据NPTⅡ的表达可对转基因T1代种子进行阴阳性及纯合株系的鉴定,对T1幼苗中NPTⅡ丰度的分析可为纯合单株的鉴定提供参考信息.定量分析表明苗期叶片中NPTⅡ蛋白质的含量约为鲜重的0.08‰.在Ca MV-35S启动子驱动下NPTⅡ蛋白质在水稻苗期、成株期的叶片和根部组织中表达量较高,而在分蘖期、孕穗期较低,NPTⅡ在不同时期的根、茎、叶、穗子、花及种子等组织中均有表达,只是在分蘖节、茎节、穗轴和花药等组织中表达量相对较低.此外,NPTⅡ蛋白质的表达主要定位在细胞质中.综上所述,本研究建立了具有应用价值的检测NPTⅡ蛋白质的免疫印记方法并系统揭示了其在水稻中的表达特征.

关 键 词：转基因水稻 CaMV-35S启动子  NPTⅡ蛋白质  免疫印迹技术

分 类 号：Q7] Q81