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期刊文章详细信息

改良差时贴壁法分离培养鉴定小鼠骨髓间充质干细胞和内皮前体细胞    

Isolation,cultivation and identification of mesenchymal stem cells and endothelial progenitor cells from murine bone marrow with a modified differential adhesion method

  

文献类型:期刊文章

作  者:冯文磊[1] 张猛[1] 印双红[2] 徐芳洁[2] 王艳杰[1] 陈雪玲[2] 吴向未[1]

机构地区:[1]石河子大学医学院第一附属医院普外科,新疆石河子832008 [2]石河子大学医学院免疫学教研室,新疆石河子832002

出  处:《解剖学报》

基  金:国家自然科学基金资助项目(31271458);人力资源和社会保障部留学回国人员科技活动资助项目(RSLX201201);兵团科技援疆资助项目(2014AB047)

年  份:2015

卷  号:46

期  号:2

起止页码:282-288

语  种:中文

收录情况:AJ、BDHX、BDHX2014、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2015_2016、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘  要:目的探索同时从小鼠骨髓分离培养间充质干细胞(MSCs)与内皮前体细胞(EPCs)及对其鉴定的方法。方法小鼠骨髓细胞经改良差时贴壁法分离,以48h为时间点,48h内贴壁细胞传至3代后行成骨、成软骨、成脂分化诱导实验,流式细胞术(FCM)检测其表面标记;48h后收集未贴壁细胞,传至3代后行血管形成实验,传至5代后行CD31免疫荧光细胞染色实验,FCM检测其表面标记。结果第3代48h内贴壁细胞可诱导分化为骨、软骨和脂肪细胞,FCM检测Sca-1、CD29、CD45、CD11b阳性率分别为(98.30±0.75)%,(97.47±1.32)%,(1.87±0.15)%,(1.03±0.71)%;第3代48h后贴壁细胞在基质胶上可形成血管样结构,第5代48h后贴壁细胞特异性表面抗原CD31呈阳性表达,FCM检测CD34、CD133、血管内皮生长因子受体(VEGFR2)阳性率分别为(88.90±1.18)%,(92.73±2.90)%,(87.63±1.79)%。结论采用改良差时贴壁法可同时分离培养扩增小鼠骨髓MSCs和EPCs,且简便高效稳定可重复。

关 键 词:间充质干细胞 内皮前体细胞 骨髓 改良差时贴壁分离法  流式细胞术 小鼠

分 类 号:R392.12]

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