文献类型：期刊文章

作　　者：侯玲玲[1] 曹华[1] 魏国荣[1] 白慈贤[1] 张涌[2] 吴祖泽[3] 裴雪涛[1]

机构地区：[1]军事医学科学院输血研究所干细胞室,100850 [2]西北农林科技大学胚胎工程实验室 [3]军事医学科学院放射医学研究所

出　　处：《中华血液学杂志》

基　　金：国家 8 63计划资助项目 (2 0 0 1AA2 1615 1) ;国家重点基础研究发展规划项目 (973 ) (G19990 5 3 90 3 ) ;北京市 2 48创新工程资助项目 (95 5 0 2 13 80 0 )

年　　份：2002

卷　　号：23

期　　号：8

起止页码：415-419

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的　探讨人脐血间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)的体外分离、纯化、扩增和向神经元样细胞的定向诱导分化条件。方法　无菌条件下采集正常人脐血 ,肝素抗凝 ,用相对密度为1.0 77的淋巴细胞分离液分离脐血单个核细胞 ,进而获得MSC。用MesencultTM 培养基进行纯化和扩增培养。用流式细胞仪检测MSC的表面标志。取扩增 2 ,5 ,8代的MSC分别向神经元样细胞诱导 ,免疫组化和组化法检测神经元样细胞特异性标志和结构。结果　脐血MSC每扩增一代 ,细胞数量增加约 2～ 3倍。 6 .6× 10 5个人脐血原代MSC在体外扩增 10代后获得 9.9× 10 8个细胞 ,扩增约 1.5× 10 3倍。流式细胞仪检测结果显示 ,脐血MSC不表达CD34 、CD1 1a和CD1 1b,强表达CD2 9,弱表达CD71 ,与骨髓MSC表面抗原特性一致。诱导后的细胞平均有 70 %左右呈现典型的神经元样表型 ,免疫组化法检测发现不同代数的MSC诱导后均表达神经丝蛋白 (neurofilament,NF)和神经元特异性烯醇化酶 (neuron specificenolase ,NSE) ;组织化学法检测可看到神经元特有结构尼氏体。结论　脐血MSC在体外有较强的扩增能力 ,能够向非间充质类细胞分化。

关 键 词：流式细胞仪  细胞替代治疗 基因治疗  脐血 间充质干细胞 体外扩增 神经元样细胞 定向诱导分化

分 类 号：R329]