文献类型：期刊文章

作　　者：何松哲[1,2] 何慧[1,2] 陈懿[1,2] 陈羽[3] 余道军[1,2]

机构地区：[1]浙江中医药大学附属杭州第一医院,浙江杭州310006 [2]杭州市第一人民医院,浙江杭州310006 [3]温州医科大学,浙江温州325035

出　　处：《中国微生态学杂志》

基　　金：杭州市科技局社会发展科研计划资助项目(20130733Q04);杭州市卫生科技计划重大项目(2012ZD001)

年　　份：2015

卷　　号：27

期　　号：2

起止页码：224-226

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2015_2016、IC、JST、PROQUEST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的分析全血标本RNA提取的影响因素,并对全血RNA提取条件进行优化。方法收集100例全血标本,混匀后分为低渗红细胞溶解组(A组,50例)和全血直接提取组(B组,50例),利用Trizol试剂提取放置在不同温度、不同保存时间的全血标本总RNA,并采用Ur-2401紫外分光光度计测定其浓度和纯度;另选60例全血标本作为反复冻融组(C组),取不同次数反复冻融的全血标本利用Trizol法直接提取其RNA。结果 A组和B组新鲜标本中所获取的RNA浓度分别为450.0 ng/μL和458.8 ng/μL,37℃保存7 d标本中的RNA浓度分别为374.8 ng/μL和375.2 ng/μL,不同的保存温度与时间均对总RNA浓度(P=0.003、P=0.002)和纯度(P值均为0.011)的差异均有统计学意义,而相同条件下提取的总RNA浓度和纯度的差异无统计学意义(P=0.984、P=0.311);C组全血标本反复冻融的次数与保存时间对总RNA浓度(P=0.002、P=0.001)、纯度(P值均为0.008)差异均有统计学意义,而保存温度对总RNA浓度和纯度差异无统计学意义(P=0.611、P=0.362)。结论不同条件下全血标本中所获取的总RNA浓度有所差异,但在总RNA纯度和成功率方面,低渗破坏红细胞法优于直接全血提取法,反复冻融影响全血RNA提取效率和得率。

关 键 词：外周全血  RNA提取 RNA浓度  RNA纯度  

分 类 号：R44] R53[临床医学类]