文献类型：期刊文章

作　　者：程希[1,2,3] 胡超杰[1,2,3] 李晚霞[1,2,3] 黄成[1,2,3] 李俊[1,2,3]

机构地区：[1]安徽医科大学药学院,合肥230032 [2]安徽医科大学肝病研究所,合肥230032 [3]安徽省创新药物产业共性研究院,合肥230032

出　　处：《安徽医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(编号:81273526);安徽省教育厅基金项目(编号:KJ2012A156);安徽省自然科学基金(编号:1308085MH145);安徽医科大学博士科研启动基金(编号:XJ201118)

年　　份：2015

卷　　号：50

期　　号：2

起止页码：149-153

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSA-PROQEUST、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的：通过建立小鼠酒精性脂肪肝（ AFL）的模型,并采用肝脏原位灌流,分离出形态良好、具有生物学活性的库普弗细胞（ KCs ）,研究其在 AFL 中的作用。方法采用Lieber-DeCarli液体饮食加一次急性酒精灌胃,建立小鼠AFL模型。造模周期为16 d,于第16天灌胃9 h后处死小鼠,取小鼠肝脏、血清及KCs。检测各组血清谷丙转氨酶/谷草转氨酶（ ALT/AST）、肝匀浆、血清中总胆固醇/三酰甘油（ TG/TC）水平变化和肝脏病理切片HE、油红染色。选取原位灌流的方法分离KCs,采用流式细胞术分析KCs表型及组成的改变。荧光实时定量PCR（ qRT-PCR）检测组织及提取细胞中各细胞因子水平。结果 ALT/AST、TG/TC等反应肝损伤的指标模型组显著高于对照组,HE及油红染色结果与之一致,表明小鼠AFL模型建立成功。肝脏原位灌流每只小鼠细胞得率约1．5×106~2．0×106个。以小鼠巨噬细胞表面标记分子F4/80及白细胞共同抗原CD45双标设门,流式细胞术分析F4/80和 CD45双阳性细胞,在模型中肝脏固有CD68＋细胞显著降低,并出现大量的浸润单核细胞。 qRT-PCR结果显示,在肝组织及原代KCs中细胞因子,肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、单核细胞趋化蛋白（MCP-1）水平显著升高。结论小鼠AFL模型建立成功,肝脏原位灌流法细胞得率较高, AFL 的发病可能与 KCs 构成、表型改变,与细胞因子升高介导外周单核细胞浸润有关。

关 键 词：酒精性脂肪肝 原位灌流  库普弗细胞 细胞因子

分 类 号：R967] R965.2[药学类]