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猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆与表达及间接ELISA方法的建立
Cloning and Expression of the SBC Gene of Transmissible gastroenteritis virus and Development of an Indirect TGEV SBC-ELISA
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]四川省遂宁市畜牧食品局,四川遂宁629000 [2]四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室/动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014 [3]四川省遂宁市船山区畜牧食品局,四川遂宁629000
基 金:国家自然科学基金项目(31072144,30901084);国家公益性行业(农业)科研专项(201203056)
年 份:2015
卷 号:51
期 号:1
起止页码:7-10
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、核心刊
摘 要:针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点编码基因片段(SBC,下同)设计合成1对引物,用PCR方法扩增SBC基因,将该基因片段定向插入到原核表达载体p ET-32a(+)中,构建原核表达载体p ET-32a-SBC。阳性质粒转化宿主菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下表达大小约38 k D的蛋白,重组蛋白以包涵体的形式存在。Western blot分析表明,表达产物具有良好的免疫学活性。以纯化的表达产物作为诊断抗原建立了检测TGEV抗体的间接ELISA(TGEV SBC-ELISA)方法。表明建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比血清中和试验高,可用于TGEV的检疫和流行病学调查。
关 键 词:猪传染性胃肠炎病毒 克隆与表达 诊断
分 类 号:S858.28]
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