文献类型：期刊文章

作　　者：李顺姬[1,2] 胡珏[1,2] 刘双清[2] 成小文[1,2] 黄国华[1,2,3]

机构地区：[1]湖南农业大学病毒研究所,湖南长沙410128 [2]湖南农业大学植物保护学院,湖南长沙410128 [3]植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室,湖南长沙410128

出　　处：《湖南农业大学学报（自然科学版）》

基　　金：国家"十二.五"科技支撑计划项目(2012BAD27B02);国家自然科学基金项目(31228020);湖南省研究生创新性研究项目(CX2013B308)

年　　份：2015

卷　　号：41

期　　号：1

起止页码：58-61

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSCD、CSCD2015_2016、INSPEC、JST、RCCSE、ZGKJHX、ZMATH、核心刊

摘　　要：以构建原核表达载体重组质粒G4FPAGB1为例,介绍了一种新的载体构建方法。棉铃虫单核衣壳核多角体病毒G4毒株基因组上的Ha–FP–A片段用Hin dⅢ和Eco RⅤ双酶切,Ha–FP–B片段用XhoⅠ和Bam HⅠ双酶切,绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因片段用Eco RⅤ和XhoⅠ双酶切,载体质粒p Bluescript SK(+)用Hin dⅢ和Bam HⅠ双酶切。酶切产物经电泳检测后,将所有含目的片段的胶块切下,放在同一个离心管中进行DNA回收,得到的混合DNA产物直接加入连接酶进行连接、转化。结果表明,3个目的片段均成功连接到载体质粒上。本方法可高效、简单地构建包含多个目的片段的重组质粒。

关 键 词：载体构建  克隆方法 一步式混合胶回收  

分 类 号：Q78]