文献类型：期刊文章

作　　者：袁天杰[1,2] 谢丽萍[1,2] 朱宝泉[1,2] 胡又佳[1,2]

机构地区：[1]中国医药工业研究总院上海医药工业研究院 [2]上海欣生源药业有限公司,上海200437

出　　处：《中国医药工业杂志》

基　　金：国家“重大新药创制”科技重大专项(2011ZX09203)

年　　份：2014

卷　　号：45

期　　号：12

起止页码：1128-1134

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、IPA、JST、RSC、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：本研究通过构建柔红霉素产生菌天蓝淡红链霉菌Streptomyces coeruleorubidus DM的基因组文库,获得2 230个重组克隆。利用菌落原位杂交和PCR筛选获得黏粒Cosmid 8-22,其插入片段大小为41 431 bp,含36个完整的开放阅读框,基本包含了完整的柔红霉素生物合成基因簇。利用黏粒Cosmid 8-22成功构建了基因打靶系统,同时敲除部分dau W和完整的dnr X基因。HPLC结果显示,敲除突变株的柔红霉素产量较出发菌提高了3~4倍。

关 键 词：柔红霉素 基因组文库 基因打靶 基因敲除

分 类 号：Q78]