文献类型：期刊文章

作　　者：刘海莉[1] 朱德晓[1] 吴金涛[1] 岳庆伟[1] 王辉[1] 李泽岩[1] 李贵宝[1] 刘增训[2] 张静[1] 孙晋浩[1]

机构地区：[1]山东大学医学院人体解剖学与组织学胚胎学研究所,济南250012 [2]山东省精神卫生中心精神科,济南250014

出　　处：《解剖学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81371471);教育部博士点基金资助项目(20120131110039);山东省科技发展计划资助项目(2011GSF11810);山东省自然科学基金资助项目(ZR2012HM026;ZR2010HM051)

年　　份：2014

卷　　号：45

期　　号：6

起止页码：755-760

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的探讨甲基苯丙胺(MA)致神经细胞毒性过程中细胞外信号调节激酶(ERK)和miR-133b的表达变化及调控机制。方法用MA建立PC12神经细胞损伤模型,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞活性及镜下形态观察确定MA最佳损伤浓度;应用流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平;通过Western blotting技术测定总ERK1/2和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的表达变化;并应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)测定miR-133b的表达变化。为进一步分析ERK/miR133b分子通路的作用关系,经U0126特异阻断ERK通路,检测miR-133b的表达变化。结果给予不同浓度的MA,均可导致PC12细胞损伤,其中800μmol/L MA处理后,大部分胞体变圆,神经突起退缩,神经网络消失。MTT结果显示细胞活性明显下降。进一步的细胞毒性机制分析显示,MA处理后,细胞内ROS水平升高,p-ERK表达增高,miR-133b表达降低;并且给予ERK通路抑制剂U0126(10μmol/L)后,miR-133b表达升高,细胞活性增强,胞内ROS水平降低,镜下细胞损伤改善。结论 MA可通过上调ERK磷酸化抑制miR-133b表达,介导神经元毒性损伤。

关 键 词：甲基苯丙胺 miR-133b  细胞外信号调节激酶 磷酸化  神经毒性 PC12细胞 免疫印迹法 实时定量聚合酶链反应

分 类 号：R741.02]