文献类型：期刊文章

作　　者：王延群[1] 郝春绪[2] 邓瑶[1] 杨扬[1] 赵莉[1] 沈晓玲[2] 谭文杰[1]

机构地区：[1]中国疾病预防与控制中心病毒病预防控制所,北京102206 [2]内蒙古医科大学基础医学院微生物学教研室,呼和浩特010110

出　　处：《中华微生物学和免疫学杂志》

年　　份：2014

卷　　号：34

期　　号：10

起止页码：764-769

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的：对中东呼吸综合征冠状病毒（ middle east respiratory syndrome coronavirus， MERS-CoV）的核衣壳蛋白（ nucleocapsid，N）进行原核表达、纯化和鉴定，了解其免疫原性。方法通过人工合成N基因，构建重组质粒pET30a-MERS-CoV-N，然后转化E．coli BL21（DE3），利用 IPTG进行诱导表达，并优化确定表达条件；采用镍柱亲和层析纯化，SDS-PAGE和Western blot验证。结果原核表达成功并纯化获得与预期大小（46＆#215;103）一致的高纯度可溶性N蛋白。 Western blot表明重组蛋白可与免疫阳性兔血清及His标签抗体发生特异性反应，但与北京地区2008年收集的30份成人血清无反应。结论 MERS-CoV的N蛋白成功在原核系统中实现表达并纯化、鉴定，为MERS-CoV的免疫学诊断和免疫原性研究奠定了基础。

关 键 词：中东呼吸综合征冠状病毒  核衣壳蛋白 原核表达 纯化 鉴定  

分 类 号：R373]