文献类型：期刊文章

作　　者：潘兴[1,2] 王保宁[1] 杨靖[3] 李健春[2] 祝捷[2] 周永君[2] 王红仁[1] 李明远[1] 李婉宜[1]

机构地区：[1]四川大学华西基础医学与法医学院微生物教研室,成都610041 [2]四川万可泰生物技术有限责任公司,成都610041 [3]湖北医药学院微生物教研室,十堰442000

出　　处：《成都医学院学报》

基　　金：四川省科技厅支撑计划项目(NO:2014SZ0036)

年　　份：2014

卷　　号：9

期　　号：5

起止页码：538-544

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSA、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的初步建立重组幽门螺杆菌多靶点疫苗工程菌（BIB）的高密度发酵及其蛋白纯化工艺。方法以摇瓶发酵结果为基础,放大工艺至50L发酵罐中,对影响目的蛋白收率的因素如发酵培养基、工作种子接种量、诱导剂浓度、诱导起始时间、诱导持续时间及诱导剂添加方式等进行优化验证;并利用rBIB蛋白高等电点特性（pI=9.05）,在pH 7.0-7.5的磷酸盐缓冲液中目的蛋白带正电荷,采用阳离子交换层析进行纯化,对阳离子交换层析填料及纯化缓冲液的pH进行优化。结果经高密度发酵后BIB菌体产量为70g/L,蛋白表达量为32%;rBIB蛋白经阳离子交换层析纯化后其纯度为91.8%。结论该工艺的初步建立为深入研究rBIB蛋白性质及其规模化生产奠定了基础。

关 键 词：幽门螺杆菌 疫苗 高密度发酵 阳离子交换层析  尿素酶B亚单位

分 类 号：R392]