文献类型：期刊文章

作　　者：吕鑫钰[1] 廖林[1] 李淑珍[1] 朱大岭[1]

机构地区：[1]哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室,黑龙江哈尔滨150081

出　　处：《哈尔滨医科大学学报》

基　　金：哈尔滨市科技攻关项目(2008AA3AS097)

年　　份：2014

卷　　号：48

期　　号：4

起止页码：274-276

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的利用原核表达系统表达人肝脏凝血因子Ⅺ(coagulation factorⅪ,F11)蛋白,并制备F11的兔多克隆抗体。方法从cDNA文库中筛选并扩增F11基因,将其分别与带有HIS标签的pET-32a及GST标签pGEX-4T-1载体连接,获得表达质粒,将表达质粒转入BL21菌中表达F11融合蛋白(分别含有HIS、GST-Tag),通过SDS-PAGE进行鉴定。获得的F11融合蛋白经纯化后作为免疫原及检测原,制备兔多克隆抗体,Western blot分析获得的兔多克隆抗体的特异性。结果成功构建pET-32a-F11、pGEX-4t-1-F11表达质粒,获得两种标签的融合蛋白。将重组蛋白纯化后作为免疫原免疫兔,取得了能与重组蛋白特异性结合的兔血清。结论成功制备了F11重组蛋白及F11兔多克隆抗体,为进一步研发F11诊断试剂打下了基础。

关 键 词：凝血因子Ⅺ  原核表达 融合蛋白 兔多克隆抗体  

分 类 号：R96]