文献类型：期刊文章

作　　者：齐亚灵[1] 赵文杰[2] 方艳秋[3] 陈玉强[4] 孟德欣[5] 王伟群[5] 李尧[1] 李文[1]

机构地区：[1]佳木斯大学基础医学院组织与胚胎学教研室,黑龙江佳木斯154007 [2]黑龙江省农垦二院内科,黑龙江佳木斯154002 [3]吉林省人民医院肿瘤生物治疗中心,吉林长春130021 [4]佳木斯大学附属第一医院普外科,黑龙江佳木斯154000 [5]佳木斯大学基础医学院生理学教研室,黑龙江佳木斯154007

出　　处：《吉林大学学报（医学版）》

基　　金：黑龙江省教育厅科研基金资助课题(11551509)

年　　份：2014

卷　　号：40

期　　号：4

起止页码：757-762

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2013_2014、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的:应用反义寡核苷酸(ASODN)技术靶向抑制生存素(survivin)基因,研究其对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响,阐明survivin反义寡核苷酸(survivin-ASODN)促进SMMC-7721细胞凋亡的作用机制。方法:设计合成survivin-ASODN序列(FAM荧光素标记)。利用脂质体介导法分别用浓度为100、200、300、400和600nmol·L-1 survivin-ASODN转染SMMC-7721细胞(ASODN转染组),并设空白对照组、空脂质体对照组和正义寡核苷酸(SODN)对照组。应用流式细胞术(FCM)检测不同浓度survivin-ASODN体外转染SMMC-7721细胞24、48和72h后SMMC-7721细胞凋亡率及细胞周期;Western blotting法检测survivin蛋白表达水平。结果:与各对照组比较,荧光素标记的ASODN转染SMMC-7721细胞24h后,细胞生长开始受到抑制,细胞凋亡率增加,呈现剂量-时间依赖性(P<0.05);作用48h后,ASODN转染组细胞在G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰,G0/G1期细胞明显减少(P<0.05),G2/M期细胞显著增加(P<0.05),细胞被阻滞于G2/M期。与各对照组比较,不同浓度ASODN转染组SMMC-7721细胞survivin蛋白表达水平下降(P<0.05),且随作用时间的延长而降低(P<0.05)。结论:survivin-ASODN通过抑制survivin蛋白表达、改变细胞周期进程等机制促进SMMC-7721细胞凋亡,并且呈现时间-剂量依赖性。

关 键 词：生存素 反义寡核苷酸 肝细胞癌  流式细胞术 转染  

分 类 号：R733]