文献类型：期刊文章

作　　者：钟晓武[1,2,3] 付强[1] 邹颉[1] 林世峰[1] 郭玉双[1] 赵杰宏[1] 任学良[1]

机构地区：[1]贵州省烟草科学研究院/烟草行业烟草分子遗传重点实验室,贵阳550081 [2]川北医学院附属医院医学研究中心,南充637000 [3]川北医学院基础医学院生物学教研室,南充637000

出　　处：《植物遗传资源学报》

基　　金：中国烟草总公司基因组重大专项(110201201006);贵州省科技厅农业攻关项目(黔科合NY字[2011]3047号);中国烟草总公司重点项目(中烟办[2010]221号);贵州省优秀青年科技人才培养对象专项资金(黔科合人字[2013]02号)

年　　份：2014

卷　　号：15

期　　号：4

起止页码：838-843

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：基于NCBI数据库中本氏烟(Nicotiana benthamiana)的烟草八氢番茄红素脱氢酶PDS基因(ABE99707)的核苷酸序列,设计并合成特异性引物,以烟草栽培品种红花大金元叶片总RNA为模板,通过PCR方法获得了烟草NtPDS基因的cDNA片段。序列分析表明,该基因编码区为1749 bp,编码582个氨基酸,推测该蛋白等电点为7.53,理论分子量为65.04 kD。通过构建融合表达载体pET-32a-NtPDS,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在37℃下经1 mmol/L IPTG诱导4 h表达后,产生了以可溶性蛋白形式存在的NtPDS融合蛋白,并通过Western blotting验证融合蛋白获得表达。利用半定量RT-PCR技术进行组织表达模式分析发现,该基因在烟草的叶片、花和茎中均有表达,在根中没有表达。该结果为进一步研究烟草八氢番茄红素脱氢酶NtPDS的活性和生物学功能奠定了基础。

关 键 词：烟草 八氢番茄红素脱氢酶 原核表达 表达谱

分 类 号：Q943.2[植物生产类]