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期刊文章详细信息

应用以菌落为模板的聚合酶链反应技术筛选重组阳性克隆    

Screen for recombinant clones by colony Polymerase chain reaction

  

文献类型:期刊文章

作  者:生秀杰[1] 周伟强[2] 姜莉[2] 王太一[1] 张学[1]

机构地区:[1]中国医科大学实验动物部 [2]中国医科大学细胞生物学重点实验室

出  处:《中华检验医学杂志》

基  金:国家"九五攻关"项目 (96 A2 3 0 60 2 );国家自然科学基金 (3 9980 0 11)

年  份:2002

卷  号:25

期  号:4

起止页码:239-240

语  种:中文

收录情况:BDHX、BDHX2000、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘  要:目的 应用以菌落为模板的聚合酶链反应 (PCR)技术筛选插有小鼠Doc 1R基因组序列的重组阳性克隆。方法 应用扩增小鼠Doc 1R基因组序列时使用的引物 ,以基因重组扩增后得到的菌落为模板 ,直接进行PCR扩增。结果 在筛选的 5个菌落中有 3个可见到 15 0 0bp大小的阳性条带与Doc 1R基因片段大小一致的阳性克隆 ,并对此 3个阳性克隆分别提取质粒 ,进一步进行双酶切及序列分析鉴定 ,证明结果正确。结论 菌落PCR用于筛选重组阳性克隆是一种简便、快速、可靠。

关 键 词:聚合酶链反应 基因 克隆 基因重组试验  

分 类 号:R446.9]

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