文献类型：期刊文章

作　　者：侯义龙[1] 张开春[2] 吴禄平[3] 胡文玉[3] 林珂[2] 冯晓元[2] 邢福有[4]

机构地区：[1]中国科学院沈阳应用生态研究所,辽宁沈阳110015 [2]北京市林业果树研究所,北京100093 [3]沈阳农业大学,辽宁沈阳110161 [4]大连大学生物工程学院,辽宁大连116622

出　　处：《沈阳农业大学学报》

年　　份：2002

卷　　号：33

期　　号：2

起止页码：122-125

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：本研究设计了一种新的RNA提取方法 ,解决了RNA提取时容易被降解和污染这一关键问题。通过加入Rnase抑制剂 ,消除了同外源RNase对RNA的降解 ,结合DNA难呈低盐溶液(140mmol·L -1NaCl)的原理 ,去除了DNA对RNA提取液的污染 ;先后使用酚和氯仿 ,有效地去除了蛋白质和酚类物的污染 ,利用抗氧化剂PVP和巯基乙醇 ,消除了内源酚类物质氧化变色对病毒RNA逆转录的影响。采用上述方法可以在4～5h内得到纯度高、含量大、完整性好的果树总RNA ,并获得了逆转录活性较强的病毒RNA ,同时使提取RNA的成本降低。这些方法对苹果、葡萄、桃、樱桃等果树总RNA的提取均适用。

关 键 词：果树组织  总RNA 提取  逆转录 聚合酶链式反应

分 类 号：S66]