文献类型：期刊文章

作　　者：安立龙[1] 杨奇[2] 窦忠英[2] 高志敏[2] 雷安民[2] 杨春荣[2] 邱怀[2]

机构地区：[1]湛江海洋大学农学院,广东湛江524088 [2]西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室,陕西杨凌712100

出　　处：《中国兽医学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目 ( 396 70 35 9) ;国家攻关课题 ( 96 -C0 10 3)

年　　份：2002

卷　　号：22

期　　号：2

起止页码：187-190

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：以荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎为材料 ,研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛胚胎干细胞和小鼠胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离 ;在 ES细胞分离与克隆中 ,以 15 %～ 2 0 %犊牛血清为宜 ,在 DMEM(L)培养基中添加 0 .1μmol/LNa2 Se O3 +0 .1mmol/Lβ-巯基乙醇 +10 μg/L IGF+10 0 0 IU/m L L IF,能显著提高牛 ES细胞分离与克隆效率 ;在TCM199、DMEM(高糖 )和 DMEM(低糖 ) 3种培养基中 ,低糖 DMEM更适宜于牛 ES细胞的分离 ;优秀胚胎形成的团状 ICM更适宜于分离与克隆 ES细胞 ,在 37℃用低浓度消化液处理 ICM或 ES细胞集落 ,再以机械将其离散为细胞小块 ,ES细胞克隆效率最高。

关 键 词：牛  小鼠 胚胎干细胞 内细胞团 分离  克隆

分 类 号：S823]