文献类型：期刊文章

作　　者：崔晓东[1] 王婷芬[1] 杜晶晶[1] 王转花[1,2]

CUI Xiao-Dong;WANG Ting-Fen;DU Jing-Jing;WANG Zhuan-Hua(Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering of Ministry of Education,Institute of Biotechnology,Taiyuan 030005,China;School of Life Sciences,Shanxi University,Taiyuan 030005,China)

机构地区：[1]化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西大学生物技术研究所,太原030006 [2]山西大学生命科学学院生物工程系,太原030006

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(No.31300653);山西省应用基础研究计划项目(No.201801D121192)资助~~

年　　份：2019

卷　　号：35

期　　号：2

起止页码：196-204

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、JST、PUBMED、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：本研究对来源于苦荞的α-螺旋发夹抗菌肽Ft AMP抗真菌机制与结构之间的关系进行了研究。首先人工合成了Ft AMP分子中N-端和C-端的α-螺旋(Ft AMP-N和Ft AMP-C),探究两个α-螺旋究竟是哪个螺旋在起抗菌作用。然后以Ft AMP为模板,α-螺旋区电荷和两亲性特征为变化要素,利用螺旋轮投影和特定氨基酸残基替换的方法,对其进行初步分子改造,并通过对多肽结构和活性比较,探讨Ft AMP结构-功能的关系。研究表明,Ft AMP-N和Ft AMP-C都显示出良好的抗菌活性。根据螺旋轮投影方法分析螺旋的两亲性特征,并以Ft AMP氨基酸序列为模板,分别表达4个Ft AMP突变体(Ft AMP-E12A、Ft AMP-E12A/E9K、Ft AMP-E12A/E9A和Ft AMP-E12A/E9K/T24E)。圆二色光谱分析显示,4个多肽都可正确折叠成α-螺旋结构,在208 nm和222 nm处有典型的双负峰,表明氨基酸的改变及其表达过程中并未改变多肽的二级结构。抗真菌活性分析显示,与Ft AMP相比,4种突变体对植物真菌的抑制作用均有一定增强。特别是Ft AMP-E12A/E9K突变体,其抗真菌作用增强约1倍,同时诱导溶血活性并不显著,选择特异性提高近2倍。该研究也进一步表明,α-螺旋发夹抗菌肽发挥抗真菌效应主要与其螺旋结构有关,而与其抑制剂的活性位点没有关系,为该类抗菌肽结构和功能的关系提供了一定的参考。

关 键 词：苦荞抗菌肽  蛋白酶抑制剂  抗真菌活性  分子改造 溶血活性

分 类 号：Q516]