文献类型：期刊文章

作　　者：王睿敏[1] 施开创[2] 黎宗强[1] 尹彦文[2] 谢守玉[2] 莫胜兰[2] 陆文俊[2] 屈素洁[2]

WANG Rui-min;SHI Kai-chuang;LI Zong-qiang;YIN Yan-wen;XIE Shou-yu;MO Sheng-lan;LU Wen-jun;QU Su-jie(College of Animal Science and Technology,Guangxi University,Nanning 530005,China;Guangxi Center for Animal Disease Control and Prevention,Nanning 530001,China)

机构地区：[1]广西大学动物科技学院,广西南宁530005 [2]广西动物疫病预防控制中心,广西南宁530001

出　　处：《中国兽医科学》

基　　金：广西水产畜牧科技项目(桂渔牧科201528017);广西科技重大专项(桂科AA17204057)

年　　份：2019

卷　　号：49

期　　号：2

起止页码：190-198

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2019_2020、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪Delta冠状病毒(PDCoV)和猪轮状病毒(PRoV)基因序列,分别设计特异性引物,扩增PEDV N基因(750 bp)、TGEV M基因(544 bp)、PDCoV N基因(183 bp)和PRoV VP6基因(329 bp)。经过对引物浓度、退火温度等反应条件的优化及特异性、敏感性、重复性试验,成功建立了快速鉴别检测PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV的多重RT-PCR方法。该方法仅对PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV检测为阳性,对口蹄疫病毒(FMDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪细小病毒(PPV)等主要病毒的扩增均为阴性。PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV重组质粒标准品的检出下限分别为1.57×10~2、1.57×10~3、1.57×10~2、1.57×10~2copies/L。相同条件下的重复性试验获得均匀一致的结果。应用所建立的方法检测2017—2018年采集自广西各地的270份腹泻病料,结果显示,PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV的阳性率分别为15.56%、11.48%、10.74%、1.85%,并且存在混合感染现象。上述结果表明,所建立的多重RT-PCR方法可用于PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV的快速鉴别检测及流行病学调查。

关 键 词：猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪Delta冠状病毒  猪轮状病毒 多重RT-PCR 检测方法  

分 类 号：S852.659.6]