文献类型：期刊文章

作　　者：张素姣[1] 王东亮[1] 李萌[1] 蒋一凡[1] 湛洋[1] 王乃东[1]

ZHANG Su-jiao;WANG Dong-liang;LI Meng;JIANG Yi-fan;ZHAN Yang;WANG Nai-dong(College of Veterinary Medicine ,Hunan Agricultural University/Hunan Provincial Key Laboratory of Pratein Engineering in Animal Vaccines/R &D Center for Animal Reverse Vaccinology of Hunan Province,Changsha 410128,China)

机构地区：[1]湖南农业大学动物医学院兽用蛋白质工程疫苗湖南省重点实验室兽用疫苗逆向创制湖南省工程研究中心,湖南长沙410128

出　　处：《中国兽医科学》

基　　金：国家自然科学基金项目(31372406);湖南省教育厅重点项目(15A086);湖南省自然科学基金面上项目(2018JJ-2177);湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目(SCX1836);湖南农业大学校科学基金项目(17QN10)

年　　份：2019

卷　　号：49

期　　号：2

起止页码：176-182

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2019_2020、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：Loop EF是猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白的重要Loop结构,然而它在PCV2组装过程中的作用仍不清楚。本研究通过模拟PCV2病毒样颗粒(VLPs)3D结构,比较分析PCV2和PCV1、PCV3的氨基酸序列以及预测Loop EF的突变位点,筛选出PCV2 Loop EF中可供外源表位替换或插入的capsid表面位点,即第133位丙氨酸。探索性地针对该位点设计3个突变体,分别为猪细小病毒1型(PPV1)B细胞线性表位(228QQITDA233)插入PCV2 Cap第132和133位氨基酸、第133和134位氨基酸之间及替换第133位氨基酸。利用over-lap PCR等技术构建上述3个突变体的重组质粒,在大肠杆菌(BL21/DE3)中表达,并利用镍柱亲和层析纯化3个突变体蛋白,最后在体外进行VLPs组装,电镜结果显示3个突变体蛋白均可体外组装成完整的VLPs。结果表明,Loop EF中第133位丙氨酸的替换或插入外源表位突变不影响VLPs组装,提示PCV2 VLPs Loop EF展示外源抗原表位具有可行性。

关 键 词：猪圆环病毒2型 病毒样颗粒 外源表位  突变体蛋白

分 类 号：S852.659.2]