期刊文章详细信息
家蚕常用内参蛋白多克隆抗体的制备及应用比较分析
Preparation and Comparative Analysis of Polyclonal Antibody to Reference Proteins in Silkworm,Bombyx mori
文献类型:期刊文章
Wang Yuanzhuo;Wei Bofan;Chen Ying;Yang Juanjuan;Qiao Huili(Henan Key Laboratory of Insect Biology in Funiu Mountain,College of Agricultural Engineering,Nanyang Normal University,Nanyang Henan 473061,China)
机构地区:[1]南阳师范学院农业工程学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室
基 金:河南省教育厅高等学校重点科研项目(No.17A180031);河南省高等学校青年骨干教师项目(No.2016GGJS-127);南阳师范学院STP项目(No.STP2017024)
年 份:2018
卷 号:44
期 号:6
起止页码:859-866
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:内参基因是一种在所有组织和细胞中都表达的管家基因,常被用作基因和蛋白质功能研究中的参照。目前市场上商品化的内参抗体在家蚕中检测不稳定,制备高效、特异的可用于家蚕研究的内参抗体显得十分必要。对家蚕中常用的内参基因actin和tubulin进行克隆,构建其原核表达载体;通过原核表达和纯化,获得了纯度较高的融合蛋白;免疫新西兰大白兔后,成功制备了二者的多克隆抗体;酶联免疫吸附检测Actin抗体和Tubulin抗体的效价分别为1∶1000和1∶16000。Western blot结果表明,制备的家蚕内参抗体不仅能特异结合家蚕蛋白,同时可有效检测其他昆虫及哺乳动物中的相应蛋白,且抗体制备简单,成本较低,从而增加了内参抗体的多样性和选择性,为后续家蚕蛋白的功能研究奠定了基础。
关 键 词:家蚕 肌动蛋白 微管蛋白 甘油醛-3-磷酸脱氢酶 抗体
分 类 号:S881.2] Q786]
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