期刊文章详细信息
CRISPR1上游侧翼序列用于大肠埃希菌和志贺菌鉴定的效果评价
Identification and evaluation on methods with upstream flank sequences of CRISPR1,regarding Escherichia coli and Shigella
文献类型:期刊文章
Liang Wenjuan;Cui Congcong;Duan Guangcai;Liu Huiying;Xu Yake;Xi Yuanlin;Yang Haiyan;Chen Shuaiyin(Department of Epidemiology and Statistics,School of Public Health,Xinxiang Medical University,Xinxiang 453003,China;Department of Epidemiology,College of Public Health,Zhengzhou University,Zhengzhou 450001,China;Henan Innovation Center of Molecular Diagnosis and Laboratory Medicine,Xinxiang Medical University,Xinxiang 453003,China)
机构地区:[1]新乡医学院公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室,453003 [2]郑州大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系,450001 [3]新乡医学院分子诊断与医学检验技术河南省协同创新中心,453003
基 金:国家重大科技专项(2013ZX10004607);新乡医学院分子诊断与医学检验技术河南省协同创新中心(XTCX一2015一PY4);新乡医学院博士启动课题(XYBSKYZZ201805).
年 份:2018
卷 号:39
期 号:12
起止页码:1607-1610
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的探讨基于成簇规律间隔的短回文重复序列(CRJSPR)1上游侧翼序列对大肠埃希菌和志贺菌鉴定和评价效果。方法通过BLAST重复序列识别并获得全基因组测序大肠埃希菌和志贺菌的CRISPRs和CRISPR相关基因(CRISPR-associated,cas),并分析其种系;选取CRISPRs上、下游各500bp侧翼序列,使用ClustalX进行序列比对;采用PCR方法扩增CRISPR1上游侧翼序列,以确定其对大肠埃希菌和志贺菌鉴定和评价效果。结果73.4%(149/203)的大肠埃希菌存在I-E型CRISPR/Cas系统,包含了A、B1、D种系;8.4%(17/203)的大肠埃希菌存在I-F型CRISPR/Cas、17.2%(35/203)的大肠埃希菌不存在CRISPR/Cas,这2种大肠埃希菌均属于B2种系;9株志贺菌均存在I-E型CRISPR/Cas。在大肠埃希菌(B2种系外)、志贺菌CRISPR1上游和大肠埃希菌(B2种系)各存在61bp侧翼序列,序列一致性为99%,且有种属特异性,PCR扩增此区域鉴定大肠埃希菌和志贺菌的灵敏度和特异度均>91%。结论基于CRISPR1上游序列可用来鉴定大肠埃希菌和志贺菌,且具有良好的效果。
关 键 词:大肠埃希菌 志贺菌 成簇规律间隔的短回文重复序列 侧翼序列 鉴定
分 类 号:R446.5]
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