文献类型：期刊文章

作　　者：聂福平[1,2] 王昱[1] 刘念源[1] 杨俊[1] 唐昌杰[1] 韩雪清[3] 王国民[1] 陈军[4] 候长军[2] 李应国[1]

NIE Fu-ping;WANG Yu;LIU Nian-yuan;YANG Jun;TANG Chang-jie;HAN Xue-qing;WANG Guo-min;CHEN Jun;HOU Chang-jun;LI Ying-guo(State Key Laboratory of bovine diseases,Engineering center for the research of imported terrestrial animal disease prevention and control in Chongqing,Inspection and Quarantine Technology Center,Chongqing Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau of China,Chongqing 400020,China;College of Bioengineering,Chongqing University,Chongqing 400030,China;China Academy of Inspection and Quarantine,Beijing 100176,China;Chongqing agriculture Committee,Chongqing 401120,China)

机构地区：[1]重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心/国家牛病重点实验室/重庆市进境陆生动物疫病防控研究工程中心,重庆江北400020 [2]重庆大学生物工程学院,重庆沙坪坝400030 [3]中国检验检疫科学研究院,北京100176 [4]重庆市农业委员会,重庆渝北401120

出　　处：《中国预防兽医学报》

基　　金：国家十三五项目(2016YFD0500907);质检公益性项目(201310093);重庆市重大应用开发项目(cstc2015yykfC80001)

年　　份：2018

卷　　号：40

期　　号：11

起止页码：1031-1036

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：为建立同时快速鉴别检测羊痘病毒属病毒(CaPV)的方法,本研究设计了一对针对CaPV的通用引物和3条特异性的TaqMan MGB探针,并对其反应条件进行优化,建立了单管同时鉴别检测3种病毒的多重TaqMan MGB荧光定量PCR方法。结果显示,该多重荧光定量PCR方法仅对牛结节性皮肤病病毒(LSDV)、山羊痘病毒(GTPV)和绵羊痘病毒(SPPV)有特异性扩增,而对牛痘病毒等其它相关病毒核酸无扩增。在10~2拷贝/μL～107拷贝/μL浓度范围内有良好的线性关系;对LSDV、 GTPV、SPPV的最低检测限分别为14.8拷贝/μL、32.9拷贝/μL、26.7拷贝/μL。标准曲线相关系数(R2)均为0.999。批内及批间变异系数均小于1.5%。应用本研究建立的方法和OIE陆生动物手册推荐普通PCR方法分别对185份临床样品和67份模拟样品进行检测,该方法检出率比普通PCR方法高约1.6%。本研究建立的CaPV多重TaqMan-MGB荧光定量PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好、操作简便快速等优点,适用于CaPV临床样品的快速鉴别检测。

关 键 词：LSDV  GTPV  SPPV  多重TaqManMGB荧光定量PCR  

分 类 号：S852.65]