文献类型：期刊文章

作　　者：谢勇恩[1] 鲍朗[1] 陈炜[1] 李学敏[1] 于向华[1]

机构地区：[1]四川大学华西医学中心基础医学院感染免疫研究室,成都610044

出　　处：《中国人兽共患病杂志》

基　　金：高校博士点基金资助项目 (编号 :2 0 0 0 0 63 0 0 6)

年　　份：2002

卷　　号：18

期　　号：2

起止页码：28-31

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2000、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的　为结核病新型疫苗研究提供靶基因和靶抗原。方法　采用PCR扩增的方法获得结核杆菌两种免疫保护性抗原Ag85A及ESAT - 6的基因 ,将其定向克隆入真核及原核穿梭表达型载体 pBK -CMV构建含嵌合目的基因的重组质粒 ,转化大肠杆菌后用IPTG进行诱导表达 ,并通过SDS -PAGE和Western -blotting对表达蛋白进行初步分析。结果　 1)从结核杆菌H37Rv株基因组DNA中扩增出Ag85A及ESAT - 6基因。 2 )成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT - 6双价抗原融合表达质粒 pBK - 85A -E6。 3)重组质粒 pBK - 85A -E6经IPTG诱导后能在大肠杆菌中稳定表达 38kDa的融合蛋白。 结论　成功构建了结核杆菌Ag85A及ESAT - 6双价抗原融合表达载体 ,并在大肠杆菌中实现了稳定表达 ,为进一步研究其在结核病基因工程疫苗研制中的应用奠定了基础。

关 键 词：结核杆菌 AG85A ESAT-6 融合表达  免疫保护性抗原  大肠杆菌 表达载体  

分 类 号：R378.911]