文献类型：期刊文章

作　　者：沈新明[1] 乔贵林[1] 张玲[1] 江培洲[1] 黄华[1] 姚开泰[1]

机构地区：[1]第一军医大学肿瘤研究所,广东广州510515

出　　处：《第一军医大学学报》

年　　份：2002

卷　　号：22

期　　号：3

起止页码：250-253

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CSCD、CSCD2011_2012、核心刊

摘　　要：目的研究曲细精管微注射法建立转基因小鼠的可行性。方法选取人巨细胞病毒启动子调控的增强型绿色荧光蛋白(pCMV-EGFP)表达载体,应用体视解剖镜和显微注射仪将不同剂量的被脂质体包裹的质粒DNA注射到不同年龄的KM小鼠曲细精管内。在注射后40d左右,雄鼠与雌鼠合笼交配;分娩后3周,剪取仔鼠尾,提取基因组DNA,应用PCR、Southernblotting技术进行整合检测。处死2只首建小鼠,荧光显微镜观察组织冰冻切片中EGFP的表达。结果共注射41只雄性小鼠,存活34只,其中32只具有交配、受精能力,获得仔鼠382只。仔鼠经检测,PCR阳性133只,Southernblotting阳性15只。小鼠的年龄、注射剂量与EGFP的整合率没有明显关系,荧光显微镜观察下没有观察到组织冰冻切片中EGFP明显表达。结论曲细精管微注射法是动物基因转移的一条简便可行的新途径。

关 键 词：曲细精管微注射  绿色荧光蛋白 转基因小鼠

分 类 号：S814.8]