文献类型：期刊文章

作　　者：奚涛[1] 王玲玲[1] 成国祥[2]

机构地区：[1]中国药科大学生物技术研究中心,南京210009 [2]上海市转基因研究中心,上海201203

出　　处：《药物生物技术》

基　　金：国家<973>项目支待(课题编号G199805119)

年　　份：2001

卷　　号：8

期　　号：6

起止页码：301-305

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、EMBASE、IC、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：采用 ＰＣＲ和定点突变的方法获得 ｃ－Ｈａ－ｒａｓ突变基因，将其克隆到ｐｃＤＮＡ３载体上，得到含有 ｃ Ｈａ－ｒａｓ６１密码子突变和核苷酸 ２７１３突变的质粒 ｐｃＤＮＡ３－ｒａｓ２。对重组质粒进行瞬时表达，Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ检测到强阳性条带。酶切重组质粒，回收含有ＣＭＶ启动子－目的基因－下游调控序列的４．３ｋｂ片段，然后将其显微注射到１ＣＲ小鼠受精卵中。将注射后的受精卵移入假孕母鼠的输卵管进行母体孕育。小鼠出生３周后，ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈ－ｅｒｎ Ｂｌｏｔ检测证实有４只小鼠基因组中整合了外源ｃ－Ｈａ－ｒａｓ突变基因。上述结果表明已成功构建了 ４只 ｃ－Ｈａ－ｒａｓ转基因小鼠。

关 键 词：C-HA-RAS 转基因小鼠 定点突变 动物模型 抗肿瘤药物 RAS基因 鉴定  

分 类 号：R979.1] Q784[药学类]