文献类型：期刊文章

作　　者：卞继峰[1] 于修平[1] 赵蔚明[1] 杨海宁[1] 王芸[1] 胡海燕[1] 周亚滨[1] 贾继辉[1] 栾怡[1] 齐眉[1] 耿昭[1]

机构地区：[1]山东大学医学院分子生物学实验室,济南250012

出　　处：《中华微生物学和免疫学杂志》

基　　金：国家自然科学基金 (396 70 0 38);山东省自然科学基金(Y96C10 0 42 )资助项目

年　　份：2001

卷　　号：21

期　　号：4

起止页码：368-372

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的　制备人乳头瘤病毒HPV16L1 E7重组腺病毒 ,以期获得防治宫颈癌的重组腺病毒减毒活疫苗。方法　以HPV16型的野毒株HPV16 114/K为模板 ,利用PCR克隆技术制备HPV16L1 E7融合基因pUC19L1 E7,含L1的 1～ 30 1氨基酸 (AA)和E7的 1～ 6 0AA的编码DNA序列 ;并转入腺病毒穿梭质粒pCA14L1 E7,与腺病毒质粒pBHG10共转染 2 93细胞 ,筛选重组腺病毒rAd5HPV16L1 E7。以PCR、ELISA和Westernblot方法鉴定重组病毒及其表达的L1 E7蛋白 ,密度梯度超速离心纯化HPV16嵌合L1 E7VLP ,电镜观察VLP的形态结构。结果　PCR DNA序列分析表明成功构建了HPV16L1 E7重组质粒pUC19L1 E7;并获得HPV16重组腺病毒rAd5HPV16L1 E7,在 2 93细胞中可高效表达L1 E7蛋白 ,并形成嵌合病毒样颗粒 (cVLP)。结论　构建的重组腺病毒rAd5HPV16L1 E7可有效表达HPV16L1 E7cVLP ,可进一步用于动物实验 。

关 键 词：乳头状瘤病毒 病毒样颗粒 腺病毒载体 疫苗  宫颈肿瘤  宫颈癌  

分 类 号：R346[基础医学类]