文献类型：期刊文章

作　　者：陈于红[1] 孙自勇[1] 朱镇华[1] 张菁[1] 傅一工[2] 朱德煦[1] 刘建宁[1]

机构地区：[1]南京大学分子医学研究所,南京210093 [2]Landing Biotech Inc Boston

出　　处：《南京大学学报（自然科学版）》

年　　份：2001

卷　　号：37

期　　号：4

起止页码：407-415

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2000、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、MR、RCCSE、ZGKJHX、ZMATH、核心刊

摘　　要：将含有 pET2 9a prouk重组质粒的人尿激酶原工程菌经 10L种子罐培养及 10 0L发酵 ,IPTG诱导表达 ,其表达量为占菌体总蛋白的 2 0 % ,表达产物经体外变复性 ,CM 纤维素离子交换层析 ,Superdex 75分子筛层析及Affi preppolymyxinsupport亲和层析去热源 ,每 10 0L发酵液得重组人尿激酶原纯品 6g ,纯度达 95 %以上 ,比活大于 1.2× 10 4 IU /mg ,双链含量低于0 .5 % ,内毒素及热源含量、宿主蛋白残留量、宿主DNA残留量等均达到临床使用标准 .其分子量 (质谱测定 )、氨基酸组成、N、C 端氨基酸序列分析等均与理论值相符 .

关 键 词：重组人尿激酶原 发酵 活化 纯化 工业化制备  基因重组技术 IPIG诱导表达  

分 类 号：TQ925]