文献类型：期刊文章

作　　者：明文玉[1] 林学颜[2] 银巍[1] 顾军[1]

机构地区：[1]中山医科大学分子医学研究中心,广州510080 [2]中山医科大学免疫学教研室,广州510080

出　　处：《中国免疫学杂志》

基　　金：广东省自然科学基金! (990 12 1)资助课题;教育部回国人员科研启动基金

年　　份：2001

卷　　号：17

期　　号：5

起止页码：228-231

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 :构建人的ureb1(hureb1)原核高效表达重组质粒 ,以此表达的外源蛋白为抗原制备抗ureb1的抗体。方法 :用XhoI/NotI从pGU 2质粒酶切得到hureb1的ORF与pGEX 4T 2的XhoI/NotI大片段连接 ,构建表达GST hureb1融合蛋白的重组载体。转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达。以粗制的GST hureb1融合蛋白分别免疫大白兔和小鼠 ,制备抗hureb1的多克隆抗体和单克隆抗体 ,采用WesternBlot进行特异性鉴定。结果 :构建了高效表达GST hureb1融合蛋白的原核表达载体 ,融合蛋白的表达量占菌体蛋白质总量的 33 45 %。以大肠杆菌表达的GST hureb1融合蛋白免疫动物制备了高滴度、高特异性的抗hureb1的抗体。结论 :利用重组GST hureb1融合蛋白免疫动物可获得高滴度的抗hureb1抗体。重组GST

关 键 词：人ureb1  DNA 重组  原核表达载体 抗体 大肠杆菌 重组融合蛋白 质粒

分 类 号：Q784]